Ստերիլ սենյակի ստանդարտացման ընթացակարգեր և ընդունման տեխնիկական պայմաններ

1. Նպատակ. Այս ընթացակարգի նպատակն է ապահովել ասեպտիկ գործողությունների և ստերիլ սենյակների պաշտպանության ստանդարտացված ընթացակարգ:

2. Կիրառման ոլորտը՝ կենսաբանական փորձարկման լաբորատորիա

3. Պատասխանատու անձ՝ որակի վերահսկիչ, փորձարկող

4.Սահմանում. Ոչ մեկը

5. Անվտանգության միջոցառումներ

Խիստ կերպով կատարեք ասեպտիկ գործողություններ՝ մանրէային աղտոտումը կանխելու համար։ Օպերատորները պետք է անջատեն ուլտրամանուշակագույն լամպը ստերիլ սենյակ մտնելուց առաջ։

6. Ընթացակարգեր

6.1. Ստերիլ սենյակը պետք է հագեցած լինի ստերիլ վիրահատարանով և բուֆերային սենյակով: Ստերիլ վիրահատարանի մաքրությունը պետք է հասնի 10000 դասի: Ներքին ջերմաստիճանը պետք է պահպանվի 20-24°C, իսկ խոնավությունը՝ 45-60%: Մաքուր սեղանի մաքրությունը պետք է հասնի 100 դասի:

6.2. Ստերիլ սենյակը պետք է մաքուր պահվի, և խստիվ արգելվում է աղբ կուտակել՝ աղտոտումը կանխելու համար:

6.3. Խստորեն կանխեք բոլոր ստերիլիզացման սարքավորումների և կուլտուրաների միջավայրերի աղտոտումը: Աղտոտվածները պետք է դադարեցնեն դրանց օգտագործումը:

6.4. Ստերիլ սենյակը պետք է հագեցած լինի աշխատանքային կոնցենտրացիայի ախտահանիչներով, ինչպիսիք են 5% կրեզոլի լուծույթը, 70% սպիրտը, 0.1% քլորմեթիոնինի լուծույթը և այլն:

6.5. Ստերիլ սենյակը պետք է պարբերաբար ախտահանվի և մաքրվի համապատասխան ախտահանիչով՝ ապահովելու համար, որ ստերիլ սենյակի մաքրությունը համապատասխանի պահանջներին:

6.6. Բոլոր գործիքները, գործիքները, ամանները և այլ իրերը, որոնք պետք է բերվեն ստերիլ սենյակ, պետք է ամուր փաթեթավորվեն և ստերիլիզացվեն համապատասխան մեթոդներով:

6.7. Ստերիլ սենյակ մտնելուց առաջ անձնակազմը պետք է լվանա ձեռքերը օճառով կամ ախտահանիչով, ապա բուֆերային սենյակում հագնի հատուկ աշխատանքային հագուստ, կոշիկներ, գլխարկներ, դիմակներ և ձեռնոցներ (կամ կրկին սրբի ձեռքերը 70% էթանոլով)՝ ստերիլ սենյակ մտնելուց առաջ: Գործողությունները կատարեք մանրէային խցիկում:

6.8. Ստերիլ սենյակն օգտագործելուց առաջ ստերիլ սենյակում ուլտրամանուշակագույն լամպը պետք է միացվի ճառագայթման և ստերիլիզացման համար ավելի քան 30 րոպե, և մաքուր սեղանը պետք է միացվի օդի փչման համար միաժամանակ: Գործողության ավարտից հետո ստերիլ սենյակը պետք է ժամանակին մաքրվի, ապա ստերիլիզացվի ուլտրամանուշակագույն լույսով 20 րոպե:

6.9. Ստուգումից առաջ փորձարկվող նմուշի արտաքին փաթեթավորումը պետք է պահվի անվնաս և չպետք է բացվի՝ աղտոտումը կանխելու համար: Ստուգումից առաջ արտաքին մակերեսը ախտահանելու համար օգտագործեք 70% սպիրտ պարունակող բամբակյա գնդիկներ:

6.10. Յուրաքանչյուր գործողության ընթացքում պետք է իրականացվի բացասական վերահսկողություն՝ ասեպտիկ գործողության հուսալիությունը ստուգելու համար:

6.11. Բակտերիալ հեղուկը կլանելիս պետք է օգտագործել ներծծող գնդիկ այն կլանելու համար: Մի՛ դիպչեք ծղոտին անմիջապես բերանով:

6.12. Յուրաքանչյուր օգտագործումից առաջ և հետո պատվաստման ասեղը պետք է ախտահանվի կրակի միջոցով: Սառեցնելուց հետո կուլտուրան կարելի է պատվաստել:

6.13. Ծղոտները, փորձանոթները, Պետրիի ամանները և բակտերիալ հեղուկ պարունակող այլ պարագաները պետք է թրջվեն 5% լիզոլի լուծույթ պարունակող ստերիլիզացման դույլի մեջ՝ ախտահանման համար, և 24 ժամ հետո հանվեն ու լվացվեն։

6.14. Եթե սեղանի կամ հատակի վրա թափվել է մանրէային հեղուկ, ապա անհրաժեշտ է անմիջապես աղտոտված տարածքի վրա լցնել 5% կարբոլաթթվի լուծույթ կամ 3% լիզոլ՝ այն մշակելուց առնվազն 30 րոպե առաջ: Երբ աշխատանքային հագուստը և գլխարկները աղտոտված են մանրէային հեղուկով, դրանք պետք է անմիջապես հանվեն և լվացվեն բարձր ճնշման գոլորշու ախտահանումից հետո:

6.15. Կենդանի մանրէներ պարունակող բոլոր իրերը պետք է ախտահանվեն ծորակի տակ լվանալուց առաջ: Կոյուղին աղտոտելը խստիվ արգելվում է:

6.16. Ստերիլ սենյակում գաղութների քանակը պետք է ստուգվի ամսական մեկ անգամ: Բաց մաքուր սեղանով վերցրեք մի քանի ստերիլ Պետրիի ամաններ՝ 90 մմ ներքին տրամագծով, և ասեպտիկորեն ներարկեք մոտ 15 մլ սննդարար ագարի կուլտուրայի միջավայր, որը հալվել և սառեցվել է մինչև մոտ 45°C: Պնդացումից հետո այն դրեք գլխիվայր 30-35°C ջերմաստիճանում: Ինկուբացեք 48 ժամ ℃ ինկուբատորում: Ստերիլությունը ստուգելուց հետո վերցրեք 3-5 ափսե և տեղադրեք դրանք աշխատանքային դիրքի ձախ, մեջտեղում և աջ կողմում: Կափարիչը բացելուց և 30 րոպե բաց թողնելուց հետո դրանք դրեք գլխիվայր 30-35°C ինկուբատորում 48 ժամ և հանեք դրանք: Ստերիլությունը ստուգելուց հետո վերցրեք 3-5 ափսե և տեղադրեք դրանք աշխատանքային դիրքի ձախ, մեջտեղում և աջ կողմում: Կափարիչը բացելուց և 30 րոպե բաց թողնելուց հետո դրանք դրեք գլխիվայր 30-35°C ինկուբատորում 48 ժամ և հանեք դրանք: 100 դասի մաքուր տարածքում ափսեի վրա տարբեր մանրէների միջին քանակը չպետք է գերազանցի 1 գաղութը, իսկ 10000 դասի մաքուր սենյակում միջին քանակը չպետք է գերազանցի 3 գաղութը: Եթե սահմանը գերազանցվում է, ստերիլ սենյակը պետք է մանրակրկիտ ախտահանվի մինչև կրկնակի ստուգումները բավարարեն պահանջները:

7. Տես «Դեղերի հիգիենիկ ստուգման մեթոդներ» և «Դեղերի ստուգման համար Չինաստանի ստանդարտ գործառնական պրակտիկա» բաժինների գլուխները (Ստերիլության ստուգման մեթոդ):

8. Բաշխման բաժին՝ Որակի կառավարման բաժին

Մաքուր սենյակի տեխնիկական ուղեցույց.

Ստերիլ միջավայր և ստերիլ նյութեր ստանալուց հետո մենք պետք է պահպանենք ստերիլ վիճակ՝ որոշակի հայտնի միկրոօրգանիզմ ուսումնասիրելու կամ նրանց գործառույթներն օգտագործելու համար: Հակառակ դեպքում, դրսից տարբեր միկրոօրգանիզմներ կարող են հեշտությամբ խառնվել: Արտաքինից անտեղի միկրոօրգանիզմների խառնման երևույթը մանրէաբանության մեջ կոչվում է աղտոտող մանրէներ: Աղտոտման կանխարգելումը մանրէաբանական աշխատանքում կարևորագույն տեխնիկա է: Մի կողմից՝ լրիվ ստերիլիզացումը, մյուս կողմից՝ աղտոտման կանխարգելումը ասեպտիկ տեխնիկայի երկու կողմերն են: Բացի այդ, մենք պետք է կանխենք ուսումնասիրվող միկրոօրգանիզմների, մասնավորապես՝ պաթոգեն միկրոօրգանիզմների կամ բնության մեջ գոյություն չունեցող գենետիկորեն ձևափոխված միկրոօրգանիզմների, մեր փորձարարական տարաներից արտաքին միջավայր դուրս գալը: Այս նպատակների համար մանրէաբանության մեջ կան բազմաթիվ միջոցառումներ:

Ստերիլ սենյակը սովորաբար մանրէաբանական լաբորատորիայում հատուկ կահավորված փոքր սենյակ է: Կարող է կառուցվել թիթեղներից և ապակուց: Տարածքը չպետք է չափազանց մեծ լինի՝ մոտ 4-5 քառակուսի մետր, իսկ բարձրությունը՝ մոտ 2.5 մետր: Ստերիլ սենյակից դուրս պետք է տեղադրվի բուֆերային սենյակ: Բուֆերային սենյակի և ստերիլ սենյակի դռները չպետք է լինեն նույն ուղղությամբ, որպեսզի օդի հոսքը կանխվի տարբեր մանրէների ներթափանցումը: Եվ՛ ստերիլ սենյակը, և՛ բուֆերային սենյակը պետք է լինեն հերմետիկ: Ներքին օդափոխության սարքավորումները պետք է ունենան օդի զտման սարքեր: Ստերիլ սենյակի հատակը և պատերը պետք է լինեն հարթ, կեղտը չպահպանող և հեշտ մաքրվող: Աշխատանքային մակերեսը պետք է լինի հարթ: Եվ՛ ստերիլ սենյակը, և՛ բուֆերային սենյակը հագեցած են ուլտրամանուշակագույն լույսերով: Ստերիլ սենյակում ուլտրամանուշակագույն լույսերը գտնվում են աշխատանքային մակերեսից 1 մետր հեռավորության վրա: Ստերիլ սենյակ մտնող անձնակազմը պետք է կրի ստերիլիզացված հագուստ և գլխարկներ:

Ներկայումս ստերիլ սենյակները հիմնականում գոյություն ունեն մանրէաբանության գործարաններում, մինչդեռ ընդհանուր լաբորատորիաներն օգտագործում են մաքուր սեղան: Մաքուր սեղանի հիմնական գործառույթը լամինար օդային հոսքի սարքի օգտագործումն է՝ աշխատանքային մակերեսի վրա տարբեր մանր փոշիներ, այդ թվում՝ միկրոօրգանիզմներ հեռացնելու համար: Էլեկտրական սարքը թույլ է տալիս օդին անցնել HEPA ֆիլտրի միջով և այնուհետև մտնել աշխատանքային մակերես, որպեսզի աշխատանքային մակերեսը միշտ պահվի հոսող ստերիլ օդի հսկողության տակ: Ավելին, արտաքին կողմում կա բարձր արագությամբ օդային վարագույր՝ արտաքին մանրէային օդի ներթափանցումը կանխելու համար:

Դժվար պայմաններ ունեցող վայրերում մաքուր նստարանի փոխարեն կարող են օգտագործվել նաև փայտե ստերիլ արկղեր: Ստերիլ արկղն ունի պարզ կառուցվածք և հեշտ է տեղափոխել: Տուփի առջևի մասում կան երկու անցք, որոնք, երբ այն չի աշխատում, փակվում են հրող-քաշող դռներով: Աշխատանքի ընթացքում կարող եք ձեռքերը ներս մտցնել: Առջևի մասի վերին մասը հագեցած է ապակիով՝ ներքին աշխատանքը հեշտացնելու համար: Տուփի ներսում կա ուլտրամանուշակագույն լամպ, իսկ կողքի փոքրիկ դռնակի միջոցով կարելի է ներս դնել սպասք և մանրէներ:

Ասեպտիկ շահագործման տեխնիկան ներկայումս ոչ միայն կարևոր դեր է խաղում մանրէաբանական հետազոտություններում և կիրառություններում, այլև լայնորեն կիրառվում է բազմաթիվ կենսատեխնոլոգիաներում: Օրինակ՝ տրանսգենային տեխնոլոգիաներում, մոնոկլոնալ հակամարմինների տեխնոլոգիաներում և այլն: